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gpc凝膠凈化的分離原理是什么?很多人都不知道

時間:2020-05-25 點擊:2313次

   凝膠色譜是以多孔凝膠為固定相,利用凝膠孔的空間尺寸效應(yīng),使不同大小的分子達(dá)到分離的一種高效液相色譜(HPLC)方法。其分離機(jī)理類似于分子篩效應(yīng),大體積分子只能滲入少量大孔,在固定相中所經(jīng)歷的路徑較短,先流出。所有孔隙都不能進(jìn)入的大體積分子,不被保留,在死體積處流出。因此,溶質(zhì)按分子體積從大到小依次流出色譜柱。在凝膠色譜中,流動相只起溶解樣品的作用,以有機(jī)溶劑為流動相的凝膠滲透色譜(GPC)應(yīng)用較多,而以水為流動相的凝膠過濾色譜的應(yīng)用相對較少,這主要是因為水溶性大分子不僅可以溶于水,通常也能溶于有機(jī)溶劑中。甲苯和二甲基甲酰胺等非極性有機(jī)溶劑是常用的流動相。在凝膠色譜中,固定相表面與溶質(zhì)分子間不存在化學(xué)相互作用,即固定相是惰性多孔材料。

  gpc凝膠凈化是凝膠滲透色譜主要應(yīng)用的一種,是樣品前處理的一種方法。
  gpc凝膠凈化是一種以惰性多孔凝膠為固定相,基于尺寸排阻原理,主要依據(jù)分子尺寸大小差異使物質(zhì)分離的一種高效液相色譜方法。
  gpc凝膠凈化的分離原理
  一個含有各種分子的樣品溶液緩慢地流經(jīng)凝膠色譜柱時,各分子在柱內(nèi)同時進(jìn)行著兩種不同的運動:垂直向下的移動和無定向的擴(kuò)散運動。
  大分子物質(zhì)由于直徑較大,不易進(jìn)入凝膠顆粒的微孔,而只能分布顆粒之間,所以在洗脫時向下移動的速度較快。
  小分子物質(zhì)除了可在凝膠顆粒間隙中擴(kuò)散外,還可以進(jìn)入凝膠顆粒的微孔中,即進(jìn)入凝膠相內(nèi),在向下移動的過程中,從一個凝膠內(nèi)擴(kuò)散到顆粒間隙后再進(jìn)入另一凝膠顆粒,如此不斷地進(jìn)入和擴(kuò)散,小分子物質(zhì)的下移速度落后于大分子物質(zhì),從而使樣品中分子大的先流出色譜柱,中等分子的后流出,分子小的后流出。

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